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魔芋胶等可食性动物胶合成为低聚糖

发布日期:2015-07-28 11:24:04
瓜尔胶是次生木本豆科农作物瓜尔豆子实中的胚乳多糖。p-甘露聚糖酶能将瓜尔胶、魔芋胶等可食性动物胶合成为低聚糖,另外,P-甘露聚糖酶在医药和酒精开采等畛域失去宽泛利用。P-甘露聚糖酶存在于各族生物体中,比方病菌、丝状真菌和动动物中。 微生物起源的P-甘露聚糖酶有活性好、起源稳固、作用热度 和pH规模广、轻易提取等长处。因而微生物起源的p-甘露聚糖酶己变成海内外的不足道位置。首次从亚麻液中筛选到株降解瓜尔胶的产P-甘露聚糖酶的金色杆菌,经过紫外诱变育种普及了菌株产甘露聚糖酶的威力,为p-甘露聚糖酶在药品、医药和酒精轻工业中的宽泛利用奠定了根底。
菌株的筛选与鉴定该研宄从亚麻液中结合并筛选到降解瓜尔胶的产P-甘露聚糖酶的病菌初筛水解圈直径H/C为5. 6,复筛采纳DNS步骤测定酶生气为64. 532U/ml。该菌株的菌落呈圆形金色色,边缘参差,名义润滑不通明,革兰氏染色阴性。该菌株的生理生化特点
以菌株HL-28基因组DNA为沙盘扩增16SrDNA序列, 失掉目标片段1474 bp。该序列测序后GenBank,获 得序列登录号KC979153。BLAST同源性比对后果预示,菌 株HL-8 与 Candidatus Chryseobacterium massiliae (登录号为 AF531766)16SrDNA序列同源性为99%。将菌株HL-28的 16SrDNA序列经BLAST比选取类似度较高的序列,利 用MEGA 4.0经过地邻法构建零碎发育树,可看出,所筛选菌株与金色杆菌亲缘关系最近。因而, 联合生理生化特点和16SrDNA序列综合后果,菌株HL-28 鉴定于 Flavobacteriaceae (黄杆菌科)Chryseobacterium (金色杆菌属)。
初筛时取舍H/C比值大的菌株,H/C比值大注明菌株降解底物威力强;菌落直径大注明菌落合适在该条件中成长。初筛染色后取舍20株正渐变菌株继续复筛,最终失去酶活最高的渐变菌株为HL-28-30,酶生气为339. 787 U/ml, 是起程菌株酶生气的5. 27倍,普及了426.54%,表明紫外诱变动机较好。HL-28-30的1~7代遗传稳固性,该菌株遗传稳固性良好。
pH值对酶生气及其稳固性的莫须有。当pH值在 2.7~5.6规模内时,酶活逐步回升,pH值大于5.6时酶活逐步上升,可见酶促反响的最适pH值为5.6,过酸过碱均招致其酶生气升高。另外,甘露聚糖酶在pH4.8~6.3规模内维持稳固,在上述pH规模内仍维持胜于80%的酶活。
病菌金色杆菌对瓜尔胶较强的降解威力,况且胞内分泌甘露聚糖酶,产生的甘露聚糖酶活性可达64. 532 U/ml, 酶活显然高于赵意平等(34.38 U/ml和21.95 U/ml)、蒙海林]等(15.66 U/ml)所测得的甘露聚糖酶生气。李剑芳、蒙海林和罗强等采纳物理诱变步骤普及了P-甘露聚糖酶活性。该研宄经过紫外诱变失去1株高产、稳产甘露聚糖酶的渐变株HL-28-30,其产p-甘露聚糖酶酶活普及到339.787U/ml,是起程菌株酶生气的5. 27倍。相反起源的p-甘露聚糖酶性质差距很大,病菌中芽孢杆菌起源的p-甘露聚糖酶的最适反响热度为50~70 T:,最适反响pH值为5. 5~7.0,耐热性较强。金色杆菌产p-甘露聚糖酶施展催化作用的最适pH为5.6,最适反响热度50丈,与起源于芽孢杆菌的p-甘露聚糖酶性质类似。今后除非须要进一步筛选生气更高、稳固性更好的菌苗之外,还应联合基因工事的步骤构建新型高效抒发的工事菌,以普及p-甘露聚糖酶的生气和产量,使其达成理论利用的目标。
魔芋胶等可食性动物胶合成为低聚糖